一、尿液標本采集和運送
1.    采集指征：（1）有典型的尿路感染癥狀；(2）肉眼膿尿或血尿；（3）尿常規(guī)檢查表現(xiàn)為白細胞或亞硝酸鹽陽性；(4)不明原因的發(fā)熱，無其他局部癥狀；（5）留置導尿管的患者出現(xiàn)發(fā)熱；（6）膀胱排空功能受損；(7）泌尿系統(tǒng)疾病手術(shù)前。
2.    采集方法：標本采集應力爭在未使用抗生素之前．注意避免消毒劑污染標本，方法有：(1）清潔中段尿：最好留取早晨清潔中段尿標本，囑咐患者睡前少飲水，清晨起床后用肥皂水清洗會陰部，女性應用手分開大****，男性應翻上包皮．仔細清洗，再用清水沖洗尿道口周圍；開始排尿，將前段尿排去，中段尿約10-20ml直接排入專用的無菌容器中，立即送檢，2h內(nèi)接種。該方法簡單、易行，是最常用的尿培養(yǎng)標本收集方法，但很容易受到會陰部細菌污染，應由醫(yī)護人員采集或在醫(yī)護人員指導下由患者正確留取。（2）恥骨上膀胱穿刺：使用無菌注射器直接從恥骨上經(jīng)皮膚消毒穿入膀胱吸取尿液，是評估膀胱內(nèi)細菌感染的“金標準”方法，但有一定的痛苦．患者難以接受。主要用于厭氧菌培養(yǎng)或留取標本困難的嬰兒尿標本的采集。(3）直接導尿：按常規(guī)方法對會陰局部進行消毒后，用導尿管直接經(jīng)尿道插人膀胱，獲取膀胱尿液，可減少尿液標本污染，準確地反映膀胱感染情況。但有可能將下尿道細菌引入膀胱，導致繼發(fā)感染，一般不提倡使用。（4）小兒收集包：對于無自控能力的小兒可應用收集包收集尿液，這種裝置由于很難避免會陰部菌群污染產(chǎn)生假陽性，所以只有在檢驗結(jié)果為陰性時才有意義。如果檢驗結(jié)果為陽性，應結(jié)合臨床進行分析，必要時可使用恥骨上膀胱穿刺或?qū)蚍羧∧蛞哼M行復檢。（5）留置導尿管收集尿液：利用留置導尿管采集標本時，應先消毒導尿管外部，按無菌操作方法用注射器穿刺導尿管吸取尿液，操作時應防止混入消毒劑，注意不能從尿液收集袋中采集尿液。
3.    采集容器：（l）應由不與尿液成分發(fā)生反應的惰性材料制成；(2）潔凈、無菌、加蓋、封閉、防滲漏；(3）不含防腐劑和抑菌劑；(4）廣口、具有較寬的底部、容積應＞50ml、盒蓋易于開啟。
4.    標本運送：標本采集后應及時送檢、及時接種，室溫下保存時間不得超過2h（夏季保存時間應適當縮短或冷藏保存）,4℃ 冷藏保存時間不得超過8h，但應注意冷藏保存的標本不能用于淋病奈瑟菌培養(yǎng)。

標本驗收
1．申請單驗收：要求尿培養(yǎng)申請單除患者的基本信息以外還應包括標本收集時間、收集方式、是否已使用抗生素等，驗收時應檢查申請單是否填寫完整。
2．標本驗收：(l）檢查標本標識是否與申請單相符；(2) 檢查標本容器有無溢漏、滲出，是否加蓋；(3）檢查送檢時間是否超過規(guī)定的標本保存時間。
3．不合格標本處理：(1）對申請單信息不全者應設(shè)法與臨床醫(yī)師取得聯(lián)系；(2）對標識不符、送檢容器不合格，送檢時間超過規(guī)定時間的標本應注明原因，退回，要求重新留取標本，并做記錄。

二、實驗室檢查

1．涂片檢查：尿路感染標本可直接做細菌培養(yǎng)，無需常規(guī)進行涂片檢查。對于臨床懷疑淋病奈瑟菌、假絲酵母菌或結(jié)核分枝桿菌感染的標本可用無菌吸管吸取尿液5-10ml置無菌試管中，3000-4000r/min離心30min，傾去上清液，取沉渣涂片，行革蘭染色或抗酸染色后鏡檢。

2．細菌培養(yǎng)：(l）普通培養(yǎng)：將收集標本的容器輕輕旋轉(zhuǎn)混勻，用定量接種環(huán)分別取尿液lul涂抹接種血平板和麥康凱平板（或中國藍平板），35-37℃培養(yǎng)18-24h，觀察結(jié)果。對導尿、恥骨上膀胱穿刺和已使用抗生素治療的患者標本應增加一個10ul接種量。（2）特殊培養(yǎng)：對懷疑有苛養(yǎng)菌感染者應采用恥骨上膀胱穿刺或?qū)蚍ú杉瘶颖?，加種一塊巧克力平板，置5%CO₂環(huán)境中培養(yǎng)48h。檢查淋病奈瑟菌、結(jié)核分枝桿菌感染時無需做定量培養(yǎng)，可將標本離心后取尿沉渣進行培養(yǎng)，以提高陽性率。（3）普通培養(yǎng)18-24h無細菌生長時，應將所有培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)24h。

 

1. 結(jié)果觀察和評價：(l)菌落計數(shù)：計數(shù)平板上的菌落數(shù)，采用1ul接種量者，將菌落數(shù)乘以10³；采用10ul接種量者，將平板菌落數(shù)乘以10²，即為每ml尿液中所含有的細菌數(shù)（CFU/ml）。如菌落生長過多無法精確計數(shù)時，則報告＞10⁵CFU /ml。（2）結(jié)果評價：正常情況下從腎臟排泌至膀胱的尿液是無菌的，但膀胱中的尿液經(jīng)尿道排出體外時可受到下尿道中正常菌群的污染，而出現(xiàn)細菌。因此對不同方法獲取的尿液標本培養(yǎng)結(jié)果需正確評價，才能有效指導臨床合理治療。一般認為，清潔中段尿標本中單種細菌菌落數(shù)＞10⁵ CFU/ml可能為感染；<5×10⁴CFU/ml可能為污染，在兩者之間需要根據(jù)具體情況進行評估。

2．陰性培養(yǎng)結(jié)果報告：培養(yǎng)48h無菌落生長，即為陰性。接種lul尿量者，應報告“培養(yǎng)48h，菌落計數(shù)＜10³CFU/ ml”；接種10ul尿量者，應報告“培養(yǎng)48h，菌落計數(shù)＜10²CFU/ml”。

3. 陽性培養(yǎng)結(jié)果報告：無意義的陽性培養(yǎng)結(jié)果報告；純培養(yǎng)報告“革蘭×性×菌生長，菌落計數(shù)：××CFU/ml”；混合菌生長報告“革蘭×性×菌和革蘭×性×菌混合生長”。有意義的陽性培養(yǎng)結(jié)果報告：報告菌落計數(shù)、細菌種屬名稱及標準抗菌藥物敏感性試驗結(jié)果。


 

附錄
1. 關(guān)于尿培養(yǎng)標本的接種：由于自然排尿收集的標本很難避免會陰部及下尿道細菌污染，所以需要定量接種、合理評價才能判斷培養(yǎng)的細菌是否與尿路感染有關(guān)。定量接種的方法有直接劃線法和傾注平板法兩種，后者由于操作步驟繁瑣，已幾乎不被臨床實驗室使用。直接劃線接種法的關(guān)鍵是應保證接種量的準確性，可使用1ul或10ul的定量接種環(huán)，方法是將接種環(huán)校準后，以垂直方向持拿，使環(huán)圈剛好浸人尿液表面（不可使尿液碰到環(huán)上方的環(huán)柄），取尿液進行接種。無定量接種環(huán)的實驗室，可使用無菌的5ul微量移液器吸取尿液加人平板，再用接種環(huán)劃線接種，將平板菌落數(shù)乘以200，即為每ml尿液中所含有的細菌數(shù)（CFU /ml）。

2．關(guān)于尿培養(yǎng)檢驗培養(yǎng)基的選擇：沒有一種平板可以適合所有尿道病原體的生長，所以應該根據(jù)標本來源及臨床對目標菌的要求選擇適合的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件。普通培養(yǎng)推薦使用血平板和麥康凱（或中國藍）平板，不能以血平板代替麥康凱或中國藍平板。
3. 關(guān)于尿培養(yǎng)結(jié)果評價：菌落計數(shù)＞10⁵CFU/ml時只是判診斷尿路感染的一般標準。對一個實驗室而言，如果僅使用一個標準對實驗結(jié)果進行解釋，那么若標準制定過松，將會造成抗生素濫用和不必要的資源浪費；制定過嚴，將有可能導致尿路感染的漏診。所以每個實驗室應在與臨床醫(yī)師密切合作的基礎(chǔ)上，根據(jù)不同的情況制定不同的解釋標準。尿培養(yǎng)菌落計數(shù)可受多種因素的影響，在一些患者即使菌落數(shù)較少，也有明顯的臨床意義，所以對菌落數(shù)＜5×10⁴CFU/ml，“規(guī)范”中認為無意義的陽性結(jié)果，不應隨意丟棄，必要時應很據(jù)患者的具體情況或與臨床醫(yī)師聯(lián)系后，決定是否需要做細菌鑒定和藥敏試驗。以下因素可使尿液中細菌數(shù)量減少，判斷結(jié)果時應予以注意：(l)使用抗生素治療，細菌生長受到抑制；(2)尿液稀釋，尿比重＜1.003，營養(yǎng)成分減少，細菌生長遲緩；(3)尿pH <5.0或＞8.5，細菌生長受阻；(4)尿頻時，膀胱內(nèi)細菌停留時間短，菌落數(shù)減少；(5)尿道口消毒液混入標本中，影響細菌繁殖，菌落數(shù)減少；(6)不同種類的細、生長速度不同、營養(yǎng)要求不同，菌落計數(shù)有所不同，有文獻推薦：革蘭陰性菌以菌落計數(shù)＞10⁵CFU/ml，而革蘭陽性菌以菌落計數(shù)＞10⁴CFU/ml為診斷尿路感染的標準。

4. 尿培養(yǎng)檢驗中常見的錯誤：(l)將尿液標本接種于增菌液中；(2)將中段尿標本離心后取沉渣進行一般細菌培養(yǎng)；(3)標本保存時間超時，細菌大量繁殖；(4)直接用導尿管頭劃線培養(yǎng)；(5)使用中段尿標本做厭氧菌培養(yǎng)。

顧問：王金良  組長：童明慶  副組長：倪安平 劉建棟

成員（按姓氏筆畫為序）：馬筱玲 王樹琴 徐英春 倪語星 孫自墉 李桂琴 任健康 鄒偉民 谷海瀛張遠春 桂炳東

（馬筱玲李桂琴執(zhí)筆）